qPCR kalibrasyonu; quantitative PCR sistemlerinde sıcaklık doğruluğunu, amplification performansını ve thermal stabiliteyi doğrulayan profesyonel kalibrasyon ve validasyon süreçlerinden biridir.
qPCR sistemleri:
özellikle:
- moleküler tanı laboratuvarları,
- genetik analiz merkezleri,
- viral analiz laboratuvarları,
- araştırma laboratuvarları,
- üniversite laboratuvarları,
içerisinde yoğun kullanılmaktadır.
qPCR Nedir?
qPCR:
DNA ve RNA analizlerinde kullanılan yüksek hassasiyetli quantitative PCR yöntemidir.
Başlıca kullanım alanları:
- viral yük analizleri,
- genetik incelemeler,
- RNA amplification,
- DNA amplification,
- moleküler tanı süreçleri.
qPCR Kalibrasyonu Neden Önemlidir?
qPCR sistemlerinde oluşabilecek küçük sıcaklık sapmaları bile:
yanlış Ct değerlerine neden olabilir.
Başlıca riskler:
- yanlış amplification sonuçları,
- düşük test hassasiyeti,
- yanlış negatif sonuçlar,
- yanlış pozitif sonuçlar,
- thermal instability.
qPCR Sıcaklık Doğrulama Süreçleri
Başlıca doğrulama süreçleri:
- thermal verification,
- sıcaklık doğrulama,
- block uniformity testi,
- ramp rate ölçümü,
- sıcaklık stabilite analizi.
Block Uniformity Testi
Block uniformity:
qPCR cihazındaki tüm kuyuların eşit sıcaklıkta çalışmasını doğrulamaktadır.
Başarısız sonuçlar:
- amplification farklılıkları,
- test tutarsızlıkları,
- yanlış qPCR sonuçları,
oluşturabilir.
Ramp Rate Ölçümü
Ramp rate:
thermal cycler cihazının sıcaklık geçiş hızını ifade etmektedir.
Düşük ramp rate:
- cycle sürelerini uzatabilir,
- amplification performansını düşürebilir,
- qPCR verimliliğini azaltabilir.
Thermal Accuracy Analizleri
Thermal accuracy:
cihazın hedef sıcaklığa doğru ulaşma performansını göstermektedir.
Başlıca analizler:
- sıcaklık sapması,
- thermal stabilite,
- sıcaklık dağılımı,
- cycle doğrulaması.
qPCR Validasyonu
qPCR sistemlerinde:
düzenli validasyon süreçleri önerilmektedir.
Başlıca validasyon süreçleri:
- IQ validasyonu,
- OQ validasyonu,
- PQ validasyonu,
- thermal verification,
- performans doğrulaması.
ISO 15189 ve ISO 17025 Süreçleri
Akredite laboratuvarlarda:
qPCR validasyonu kritik öneme sahiptir.
Başlıca standartlar:
- ISO 15189
- ISO 17025
- GMP laboratuvar süreçleri
qPCR Sistemlerinde Sık Görülen Problemler
Sahada sık görülen problemler:
- sıcaklık sapması,
- düşük thermal accuracy,
- block sıcaklık farklılıkları,
- sensör arızaları,
- fan problemleri,
- amplification hataları,
- stabilite problemleri.
Benzer qPCR Sistemleri
- Roche LightCycler 480
- Bio-Rad CFX96
- QuantStudio 5
- QuantStudio 7 Flex
- Rotor-Gene Q
- Agilent AriaMx
Sonuç
qPCR kalibrasyonu ve quantitative PCR validasyonu:
moleküler laboratuvar güvenliği açısından kritik süreçlerden biridir.
İletişim
0532 327 31 69
İletişim ve Servis Noktalarımız
Ankara Merkez Servis
Yeni Batı Mahallesi 2400 Sokak No:11
Yenimahalle / Ankara, Türkiye
İstanbul Bölge Servisi
Gülbağ Mahallesi, Trump Tower Arkası No:13
Şişli / İstanbul, Türkiye
İzmir Bölge Servisi
Alya Sokak No:54
Balçova / İzmir, Türkiye
Telefon: 0532 327 31 69
WhatsApp: WhatsApp ile Mesaj Gönder
Şirketimiz bağımsız teknik servis hizmeti sunmaktadır. Marka ve model isimleri yalnızca referans amaçlıdır.